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蛋白質分析儀的結構
蛋白質分析儀
用于分析蛋白質的含量、純度、分子量、氨基酸組成和結構等的技術。
各種蛋白質均具有其自身特定的氨基酸序列的多肽鏈,即**結構。多肽鏈又以特定的卷曲折疊方式形成空間結構,即二級、三級和四級結構。測定**結構的主要方法:是根據艾德受(Edman)發明的化學反應,用試劑異硫氰酸苯酯從鏈的N(-NH2)端逐個降解成氨基酸的衍生物,鑒定每步反應的產物,可得出肽鏈的氨基酸序列。根據這個原理設計的蛋白質序列儀,用毫克或微克的樣品一次可自動測定40~50個序列。如果要得到完整的**結構,尚需把蛋白質裂解成肽的碎片,經過肽的分離純化,肽的序列測急然后連成完整的序列。盡管有精密的自動化儀器,**結構分析仍是復雜、量大、費時的工作。近年來廣泛使用測定DNA的序列再推導出氨基酸序列的方法使序列分析又大大簡化了。空間結構測定包括使用晶體X-衍射分析、CD光譜、核磁共振譜(NMR)和激光拉曼光譜分析等方法,要求更為復雜的技術和山貴的儀器。
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